Uso de un marcador molecular en la selección de plantas resistentes a nematodos formadores de nudos Radiculares en un programa de mejora Genética de tomate.

Rosales Zamora De Zea, Ana Carolina (2004) Uso de un marcador molecular en la selección de plantas resistentes a nematodos formadores de nudos Radiculares en un programa de mejora Genética de tomate. Masters thesis, Universidad de San Carlos de Guatemala.

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Abstract

Se utilizó el marcador molecular codominante REX-1, estrechamente ligado al gen Mi, como un indicador de la resistencia a nematodos del género Meloidogyne spp, en plantas de tomate. Para estandarizar la técnica basada en PCR, se comparó la efectividad de dos Kits comerciales en la amplificación del fragmento de 750 pb correspondiente a REX-1. Sólo uno de los Kits, el de PCR Beads, permitió la amplificación efectiva del fragmento en los materiales estudiados. Este Kit fue también el único que permitió el corte efectivo de la enzima Taq I de Promega para obtener los fragmentos de restricción que permiten identificar los alelos para este marcador. Luego de estandarizada la técnica, se estudió el genotipo REX-1 de 99 materiales, dentro de los cuales se incluyó la población híbrida H44 (60 individuos), sus parentales y líneas relacionadas. Fue posible determinar el genotipo REX-1 para este grupo, no obstante, uno de los parentales de esta población híbrida, la línea GF1, presentó un genotipo homocigoto resistente aun cuando sus ancestros son susceptibles a la infección por nematodos. Aparentemente el marcador resistente REX-1 está asociado al gen Mi susceptible en esta línea y en otras asociadas al híbrido FAVI9, presentándose falsos positivos. Este hecho ha sido corroborado por estudios recientes realizados por Maxwell y Williamson (2004). En relación a la población híbrida H44 se determinó que los individuos presentan un genotipo heterocigoto y homocigoto resistente y de acuerdo con el método estadístico de Ji- cuadrada no se pudo determinar diferencias significativas con la proporción esperada de 1:1 El resto de materiales incluidos en el estudio incluyen al híbrido 2305-1, los cultivares Sun Coast, Rodade, Very Firm, Lignon y M-82 así como las líneas Ty- 197, Ty- 198, Fla 024623-y3, Fla 024524-5, Fla 024525-9, GS16 y las variedades Money Maker 1 y 5 que presentaron un genotipo susceptible para el marcador REX-1 por haber amplificado ambas 3 bandas de 320, 230 y 160 pb. Es posible que este patrón de bandas se específico para introgresiones de la especie silvestre L. chilense en el tomate cultivado puesto que D. Maxwell (2004) también ha observado este patrón en la línea GS9. Una segunda técnica fue incluida en el estudio para estudiar la segregación del marcador molecular REX-1. Con la colaboración del Departamento de Patología Vegetal de la Universidad de Wisconsin en Madison se hizo la secuenciación del fragmento REX-1 para 22 individuos que constituyen la progenie de una planta híbrida H44 que previamente se había determinado heterocigota para el marcador. El análisis de las secuencias permitió determinar por medio de polimorfismos de un solo nucleótido (SNPs) su genotipo REX-1. El método estadístico de Ji-cuadrada no permitió determinar diferencias significativas con la proporción esperada de 1:2:1. De acuerdo con los resultados obtenidos, puede afirmarse que es factible implementar el uso del marcador REX-1 para asistir regularmente la selección de plantas resistentes a nematodos, pero no se recomienda en el caso particular del programa de mejora genética de tomate de la Facultad de Agronomía, ya que el mismo está basado en las líneas derivadas de FAVI9 y las líneas de la Universidad de Florida que pueden presentar respectivamente falsos positivos y patrones de bandeo diferentes a los esperados.

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